Materiale og metode

Ketolac

Ketolac blev brugt i en mindre undersøgelse til at belyse, om det i praksis var muligt at måle forekomsten af BHB i somælk. Studiet vedrørende Ketolac er således ikke et valideringsstudie.

I undersøgelsen indgik 47 søer. Testperioden strakte sig fra søerne farede og frem til fravænning (cirka fem  uger). Hver enkelt so fik tildelt et ”ketose-kort”. På dette kort noteredes soens huld ved indsættelse og ved fravænning. Huldet vurderedes på en skala på 1-4, hvor 4 var fed og 1 var mager, se appendiks 1. Ligeledes noteredes, hvor mange kuld soen havde fået i alt, den aktuelle, fødte kuldsstørrelse, hvor mange grise den skulle passe, samt hvorvidt soen havde ædt op eller ej. Til sidst noteredes mængde tildelt foder, samt hvilke behandlinger soen gennemgik i farestalden.

Det antages, at søer har subklinisk ketose i op til tre dage før der ses kliniske symptomer. Derfor blev samtlige søer testet for udskillelse af BHB i mælken to gange ugentligt.

Figur 5. Udmalkning af so

I hele undersøgelsesperioden var der fokus på ikke at berøre stickens måleområde, samt at beskytte dette imod fugt og lys, da det kunne medføre usikkerhed omkring måleresultatet [11]. Der blev malket så meget mælk som muligt, så måleområdet var helt dækket af mælk. Dette lod sig nemmest gøre på de bagerste patter og lige før en diegivning. Nærværende testmetode var derfor utrolig tidskrævende, idet samtlige søer i farestalden skulle overvåges nøje, for dermed at sikre malkning på det rigtige tidspunkt. Gyltene havde generelt en tendens til at lade pattegrisene ”sove” med en patte i munden, hvorfor disse dyr var særlig svære at malke. Kontakt mellem stick og patte formodes at kunne udgøre en måleusikkerhed. ´

Det blev derfor noteret på ”ketose-kortet”, når en so var så svær at malke, at berøring var nødvendig for at sikre tilstrækkeligt med mælk i måleområdet.

Efter malkning blev sticken holdt stille i tre sekunder, hvorefter mælken blev rystet af. Jo længere tid måleområdet kunne reagere med mælken, jo mørkere blev farveændringen. Derfor blev en eventuel farveændring på sticken aflæst efter præcis 60 sekunder, som anbefalet [11]. Der blev ikke brugt oxytocin til at fremme mælkenedlægningen.

Precision Xceed

Dette er et håndholdt apparat, som oprindeligt er udviklet til diabetespatienter. Det er let anvendeligt i praksis, og kunne derfor være et velegnet redskab til overvågning af ketose i sobesætningerne. Apparatet måler koncentrationen i en enkelt bloddråbe.

Valideringen tog udgangspunkt i at undersøge, om målinger udført med MediSence Precision Xceed havde samme kvalitet som målinger udført med Randox Ranbut, der rutinemæssigt bruges til måling af ketose hos søer i forskningsprojekter.

Der blev indopereret venekatetre i Vena Cava på fire grise på Det Jordbrugsvidenskabelige Fakultet, Aarhus Universitet, for dermed at undgå at stresse dyrene under blodudtagningen. Grisene var almindelige slagtesvin på omkring 60 kg, og blev vurderet egnede (raske) på baggrund af foderoptag og tilvækst. Ligeledes vurderedes hårlag, bevægelighed, forekomst af rifter/sår samt grisenes interesse for omgivelserne. Grisene blev under hele perioden fodret to gange dagligt med et lavproteinholdigt foder.

10 dage efter at venekatetrene blev indopereret, blev der udtaget 10 ml, heparinstabiliseret fuldblod fra hver gris. På den måde blev det sikret, at grisene hverken led af postoperativt stress, eller påført stress forårsaget af fiksering eller venepunktur. Begge dele kunne formodes at have indvirkning på blodets sammensætning. Blodet blev udtaget to timer efter fodring for på denne måde at sikre, at grisene ikke udskilte ketonstoffer på grund af sult.

Blodet blev herefter tilsat D-(R)-3-hydroxybutyrat i seks niveauer: blank (0 mM), + 0,1 mM, +0,25 mM, +0,75 mM, +2,5 mM og +5 mM. Fuldblodet blev straks efter analyseret med Precision Xceed. Efter analysen med Precision Xceed, blev fuldblodet centrifugeret, plasma høstet og efterfølgende analyseret for BHB ved Randox Ranbut 1007 / RB 1008.

Under valideringsstudiet, blev der foretaget trippelbestemmelse af hver måling med Precision Xceed.